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2010.09.28

细胞质多聚腺苷酸化同源基因干扰 RNA会抑制在小鼠卵母细胞进行减数分裂

台湾妇产科医学会九十九年度扩大学术研讨会 论文摘要
细胞质多聚腺苷酸化同源基因干扰 RNA会抑制在小鼠卵母细胞进行减数分裂
郑恩惠1,2, 王淑红3, 黄俊嘉1, 黄梨香1,4, 陈忠义1, 李茂盛1,4
1李茂盛妇产科诊所 2中山医学大学生化科 3中山医学大学 生命科学系 4中山医学大学医学研究所

目的:已有报导指出CphX(胞质多聚腺苷酸化同源基因)会在胚胎干细胞、卵母细胞和植入前的胚胎表现。cphX基因剔除的转殖基因小鼠子代的卵子的数目和雌性仔鼠皆有显著下降。本研究的目的即是要探讨cphX基因在减数分裂进展中小鼠卵母细胞的作用。

材料和方法:本研究牺牲5周龄雌性小鼠B6CBF1以获得未成熟卵母细胞,小鼠经腹腔注射10国际单位的孕马血清促性腺激素,四十四小时后,从卵巢解剖老鼠,并且以针头将卵泡刺破,未成熟卵母细胞经收集和清洗后,置入已经使用缓冲剂预平衡的人类输卵管培养基培养。卵子在摄氏37度和控制含有百分之五的二氧化碳的空气培养箱培养,以显微注射的c-mos和cphX小干扰 RNA。所有的卵母细胞注射后24或48小时观察卵子型态。根据小鼠卵母细胞处在GV期、第一次减数分裂或第二次减数分裂分别纪录。利用统计软件进行各组之间的差异分析,P <0.05定义为显著。

结果:小鼠卵母细胞的比例达到 24小时后,卵子进入第二次减数分裂期情况如下:cphX组为3.6%(3/ 83);c-mos组为 1.3%(1 /77)。对照组为18.8%(15/ 80);和完全未注射组为52.4%(22/24)。在卵母细胞注射 cphX小干扰 RNA时,卵母细胞的数目达到第二次减数分裂阶段的卵子数与对照组比较显著下降(P <.05)。

结论:这些显示注射cphX小干扰 RNA显著抑制小鼠卵母细胞继续进行在减数分裂。因此,cphX基因可能是小鼠进行减数分裂其中的一项重要的因子。
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