知识分享
2013.02.07
畅谈FISH(FluorescenceInSituHybridization)及胚胎的选择性植入
/ 基因遗传诊断研究员曹慧美
你以为叛逆只是青少年的专利吗?你以为和老爸老妈唱反调很有个性吗?你永远无法想象什么叫做不知天高地厚,而我们的科学家就公然向老天爷下战书,要改变他替我们安排的命运。
你不可以不知道这回事喔!不然人家会认为你是潜水艇(没水平),当大家正在谈论着〝FISH〞时,你不要怀疑为什么钓鱼不用钓竿•…不要想歪了,虽然钓冤大头也不用竿子…竿子在男人那边。
你相信老天爷原来是一个大顽童吗?话说人类有23对染色体,但是老天爷偶尔会调皮捣蛋,让染色体异常,包括:
- 套数异常(numerical abnormalities):多了或少了染色体,最常见的就是第21对染色体多了一条而造成唐氏症(Down's syndrome)
- 结构异常(structural abnormalities):染色体互换(translocations),倒转(inversions),删除(deletions),重复(duplications),插入(insertions),增幅(amplifications),环状染色体(ring chromosomes),异构染色体(isochromosomes)…等等。
FISH的基本步骤大致如下:
- 样本的前处理并因定于玻片(fix)
- 渐近式的酒精脱水(dehydrate)
- 样本DNA和探针DNA的变性(dena ture)
- 样本DNA和探针DNA的杂交(hybridize)
- 洗片子(wash)
- 负染(counterstain)
- 荧光显微镜下观察结果(observe)
- A级-胚胎分裂得比例均匀
- B级-胚胎分裂得比例均匀,但有些碎片(fragment)
- C级-胚胎分裂得比例不均匀,20%以下的碎片
- C+级-胚胎分裂得比例不均匀,20%以上的碎片
- D级-胚胎分裂得一团乱,搞不清是细胞还是碎片
现在,科学家们发展了胚胎切片技术(embryo biopsy),让胚胎在6-8细胞期时取l-2颗细胞做基因诊断,我们称它为植入前胚胎诊断(Preimplantation genetic diagnosis),使FJSH的应用发挥到极致,如此内外兼顾,以期生出最健康的宝宝。
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